基質(zhì)效應對臨床樣本結果的干擾
發(fā)布日期:
2024-01-26
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目前臨床上常用室間質(zhì)量評價(jià)(EQA)和能力對比分析(PT)來(lái)評價(jià)和監測實(shí)驗室檢測結果的準確性,但是實(shí)驗數據表明,在分析某些項目時(shí),許多室間質(zhì)控材料均存在明顯的基質(zhì)效應,故此時(shí)的EQA/PT成績(jì)并不能客觀(guān)地反映該實(shí)驗室檢測結果的準確性,因此臨床及實(shí)驗室標準化協(xié)會(huì )(CLSI)頒發(fā)了EPl4A文件用于評價(jià)質(zhì)控材料的基質(zhì)效應。


基質(zhì)效應對臨床樣本結果的干擾



01

什么是基質(zhì)效應?








基質(zhì)效應是指“樣本中除分析物以外,所有其他成份所介導的分析誤差”,影響分析物定量測定的準確性?!盎|(zhì)效應”是一個(gè)很廣泛的概念,它幾乎存在于所有樣本中,當你想要測定樣本中任何一個(gè)分析物時(shí),都不可避免地要受到“周?chē)镔|(zhì)”的影響。按Robert Rej的觀(guān)察,基質(zhì)效應是來(lái)自于生物標本中未知的或性質(zhì)不明的物質(zhì)或特性(Properties,如黏度,表面張力,蒸汽壓,pH)所引起干擾。
對于臨床實(shí)驗室來(lái)說(shuō),首要目的是要準確地測定病人標本。因此,廠(chǎng)家在儀器與試劑的研制過(guò)程中和在方法學(xué)的選擇過(guò)程中,是以病人的新鮮血清標本作為“最佳”的檢測對象。此時(shí),測定系統對新鮮血清標本而言不考慮基質(zhì)效應,也就是說(shuō),認定該測定系統對新鮮血清標本的基質(zhì)效應接近于零。當測定質(zhì)控血清或校準品時(shí),由于質(zhì)控血清和校準品是經(jīng)過(guò)加工處理過(guò)的,因此它的反應特性不同于新鮮血清標本的反應特性,使測定結果出現偏差。這就是基質(zhì)效應。這種由于基質(zhì)效應引起測定結果的偏差又稱(chēng)為基質(zhì)偏差(matrixbias)。
基質(zhì)效應對方法的檢出限(LOD)、線(xiàn)性、準確度和精密度會(huì )產(chǎn)生嚴重的影響,在校準品和質(zhì)控品的開(kāi)發(fā)過(guò)程中應盡量減小或控制基質(zhì)效應的影響。








02

基質(zhì)效應的特性








多變性:
同一基質(zhì)狀態(tài)的基質(zhì)效應因檢測方法和檢測條件而異。
確定性:
只要是經(jīng)過(guò)處理的樣品(參考物,校準品,質(zhì)控品)與臨床樣本的基質(zhì)不一致,就會(huì )產(chǎn)生基質(zhì)效應。
相對性:
并不是所有的基質(zhì)效應都是不可接受的,某些檢測系統的基質(zhì)效應可以忽略不計,或者基質(zhì)效應引入的誤差在可接受范圍內。








03

基質(zhì)效應的產(chǎn)生原因及控制方法






1. 儀器的設計



儀器的設計與分辨率是造成基質(zhì)效應的一個(gè)重要因素。高性能高分辨率能在一定程度上排除基質(zhì)效應的影響。儀器設計中與基質(zhì)效應有關(guān)的因素有樣品,樣品空白,(酶活性測定時(shí))加熱單元的穩定性,吸樣系統的精確度,試劑/樣品的攜帶污染,分光光度計分辨率,自動(dòng)化程度及分析后數據處理方式等也是產(chǎn)生基質(zhì)效應的重要因素。上述因素可以解釋,為什么有些自動(dòng)分析儀對參考物或質(zhì)控物表現出較小的基質(zhì)效應,而另一些自動(dòng)分析儀則表現出較明顯的基質(zhì)效應。


2. 試劑的組成成分



試劑成分中,工具酶的來(lái)源(微生物源性或動(dòng)物源性),濃度和純度等影響檢測特異性和檢測結果。以酶法測定膽固醇的試劑為例,不同來(lái)源的膽固醇酯酶(微生物源性和胰原性)對長(cháng)鏈脂肪酸膽固醇酯的水解效率不一樣,例如膽甾烯基花生四烯酸在動(dòng)物源性血清中含量很高,而在人血清中含量很低,從而造成質(zhì)控血清中或病人血清中膽固醇酯水解效率的差別。Wiebe和Bernet發(fā)現一種微生物源性的膽固醇酯酶(BoehringerMannheimDiagnostics)和動(dòng)物胰源性的膽固醇酯酶(DowDiagnostics)對膽固醇酯(包括膽甾烯基花生四烯酸)水解效率幾乎相同。所以,若在參考物中添加的是非人源性膽固醇酯,用不同酶法試劑盒測定時(shí)可能會(huì )產(chǎn)生基質(zhì)效應。


3. 分析方法的特異性



基質(zhì)效應與分析方法缺乏特異性有關(guān)。特異性的IFCC定義:一種分析方法能單獨地測定出目標分析物的能力。如果,分析方法的特異性差,那么基質(zhì)中與目標分析物相似的一些物質(zhì)也同時(shí)被測定出。病人血清標本有時(shí)也會(huì )遇到異常特性(Attribute,屬性或特性),例如,總蛋白濃度異常,藥物,或濁度等。因此,對臨床標本的處理和稀釋必須仔細規定。
方法學(xué)不同對基質(zhì)效應的敏感性不同。有些測定方法對基質(zhì)效應不敏感;有些測定方法對基質(zhì)效應很敏感,例如,膽固醇和膽紅質(zhì)測定,需要用人血清型校準液。Doumas BT報道用膽紅質(zhì)氧化酶測定結合膽紅質(zhì)時(shí),一定要用人血清配制的校準液。使用人白蛋白配制的校準液,測定結果有差異;用牛白蛋白配制的校準液,測定結果差異更大。因此,在選擇用于臨床測定方法時(shí),應選擇那些對參考品的基質(zhì)效應不敏感的方法,這對用參考品來(lái)評價(jià)準確度時(shí)尤為重要。


4. 參考物或質(zhì)控物的組成



檢驗科日常的主要測定物是病人新鮮血漿或血清,測定方法的最佳條件就是依據新鮮血漿或血清而建立的。所以,理想的質(zhì)控血清應該和實(shí)驗室所用的臨床標本的反應特性相一致(如用新鮮的,非凍干血清、血漿或全血的參考品)。當測定參考物或質(zhì)控物時(shí),由于它們經(jīng)過(guò)加工處理,如冷凍干燥、添加穩定劑和某些分析物等,與日常檢驗的病人樣本的基質(zhì)不同,會(huì )產(chǎn)生基質(zhì)效應。
在酶的質(zhì)量控制中,酶的參考品(血清)中所含酶的來(lái)源,最好是人源性的酶,或者所用酶的催化行為應接近于人血清中酶的催化行為。就是說(shuō)參考品或質(zhì)控物中酶的催化行為與臨床標本中酶的催化行為之間的差異越小,基質(zhì)效應就越小,那么這種參考物或質(zhì)控物的“可通用性或可兼容性”就越大。否則,就會(huì )出現測定誤差。












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